郑州大学学报(理学版)

2019, v.51(03) 109-114

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卡那霉素单克隆抗体的研制及ELISA检测方法的建立
Development of Anti-kan Monoclonal Antibody and Establishment of ELISA Detection Method

王爱萍;孙换平;刘燕凯;黄进勇;陈玉梅;祁艳华;李永欣;张改平;

摘要(Abstract):

采用EDC法制备卡那霉素(KAN)完全抗原、卡那霉素-牛血清白蛋白(KAN-BSA)、卡那霉素-鸡卵清蛋白(KAN-OVA).用KAN-BSA完全抗原免疫BALB/c小鼠,并通过杂交瘤技术制备能够稳定分泌抗KAN单克隆抗体的杂交瘤细胞(1E1).通过体内诱生腹水大量制备单克隆抗体,鉴定1E1单克隆抗体,其效价为8×10~5,亲和力为2. 8×10~9L/mol,半数抑制浓度(IC50)为1. 09 ng/mL,与妥布霉素(TOB)的交叉反应率为53. 4%,与其他氨基糖苷类化合物没有交叉反应性.利用该单克隆抗体,建立KAN间接竞争酶联免疫吸附试验(ciELISA).ciELISA检测KAN在牛奶中的回收率为64. 4%~89. 6%,最低检测限为1. 92 ng/mL.

关键词(KeyWords): 卡那霉素;单克隆抗体;ciELISA

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家科技支撑计划课题“抗生素类快速检测技术研究”项目(2014BAD13B05)

作者(Author): 王爱萍;孙换平;刘燕凯;黄进勇;陈玉梅;祁艳华;李永欣;张改平;

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